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梅里埃20100 腸桿菌鑒定試劑盒API20E

簡要描述:梅里埃20100 腸桿菌鑒定試劑盒API20E
貨號:20100 貨品名稱:腸桿菌和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒(比色法) 規格:25條/盒
用途:
該產品用于腸桿菌和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定。
該產品用于可導致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定,臨床常
見樣本來源有糞便、直腸拭子、尿、血等。
說明書在附錄可自行下載領取

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2023-12-01
  • 訪  問  量:10090
詳細介紹

 

REF 20 100 / 20 160 07584E - CN - 2004/05

® 20 E

腸桿菌和其它革蘭氏陰性桿菌鑒定系統

概要說明

API 20 E 是腸桿菌科和其它非苛養 G-桿菌的標準鑒定系

統 包括 21 個標準化微型生化測試和鑒定資料庫 可鑒定

的菌譜名錄 請參考說明書后的鑒定表

原理

API 20 E 試驗條是由 20 個含干燥底物的小管所組成 這些

測定管用細菌懸浮液接種 培養一定時間後 通過代謝作

用產生顏色的變化 或是加入試劑後變色而觀察其結果

根據說明表判讀反應 參照分析圖索引或使用鑒定軟件得

到鑒定結果

試劑盒內容物

25  測試試劑盒 ( 貨號. 20 100)

- 25 API 20 E 試條

- 25 培養盒

- 25 結果報告單

- 1 個封口夾

- 1 份產品說明書

100 測試試劑盒 ( 貨號. 20 160)

- 100 API 20 E 試條 (4x25 試條)

- 100 培養盒

- 100 結果報告單

-  1 個封口夾

-  1 份產品說明書

試條的成分

API 20 E 試條的成分請參閱說明書后的結果判讀表

必需但未提供的試劑和材料

試劑

- 0.85 % API NaCl 培養基 5 ml (Ref. 20 230) or

API 懸浮培養基 5 ml (Ref. 20 150)

- API 20 E 附加試劑盒 (Ref. 20 120) 或

單個的附加試劑  TDA (Ref. 70 402)

JAMES (Ref. 70 542)

VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422)

NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442)

- Zn 試劑 (Ref. 70 380)

- 氧化酶 (Ref. 55 635*)

* 目錄中沒有銷售的國家 請使用相近的試劑

- 礦物油 (Ref. 70 100)

- API 20 E 數值分析圖譜(Ref. 20 190) 或

鑒定軟件

材料

- 吸管或 PSI 管

- 安瓿開啟器

- 安瓿架

- 微生物實驗室一般設備

可能需要的附加試劑

- API OF 培養基 (Ref. 50 110) :

用于測定發酵型或氧化型代謝作用

- API M 培養基 (Ref. 50 120) :

用于測定兼性厭氧菌的運動性

警告和注意

•  僅供體外診斷和微生物質控使用

•  僅供專業人員使用

• 此試劑盒中含有動物源性成分 已知所使用原始材料和動

物的衛生狀況不能*保證其不含傳染性的物質 因此我

們建議所有樣品應被視為具有傳染性 并應按通常的安全

措施對其進行正確處理 勿吸入或咽下

• 所有標本 細菌培養物 接種物應被視為 具有傳染性并

應進行正確處理 在整個試驗過程中 要遵守無菌技術要

求和通常使用的防范措施 可參照 NCCLS M29-A 保

護試驗室工作人員免受儀器生物公害和通過血液 體液

組織傳染的疾病的侵害-當前版本 的內容 另外的防護

措施 可參照 微生物和生物醫學實驗室的生物研究安全

-CDC/NIH – 新版本 或參照各國正在使用的規章執


• 不要使用過期的試劑

• 使用前 請檢查包裝和成分是否完整

• 不要使用已經破損的試條 杯子破壞 干燥劑小袋已打開


• 有關產品性能的數據均由嚴格按照作步驟所進行的試驗得

出 任何操作步驟的改變或偏離均會影響試驗結果

• 試驗結果的判斷應由合格的微生物家所作 同時應將病

史 標本來源 菌落和顯微形態考慮在內 如有可能 再

作一些附加試驗 尤其是抗生素敏感譜

儲存條件

試驗條采用鋁袋包裝并附有干燥劑

一旦打開鋁袋(*) 請使用封口夾(試劑盒已含有)重新封口

以保證試條的干燥 把鋁袋撕開處末端放入打開的夾子并

小心的加緊兩端 開啟鋁袋后 在 2-8 環境下 試驗條可

享有 10 個月的有效期(或包裝盒上的有效期 以較短時間

為準)

(*) 建議開封的方法 在封口下方剪開鋁箔裝 為防止意外

損壞干燥劑 開封時應保持鋁箔袋垂直

標本  采集和前處理

API 20 E 不能直接用于臨床或其他標本

需要進行鑒定的微生物必須首先根據標準微生物處理技術

于適合腸桿菌和/或非苛養革蘭氏陰性桿菌的培養瓊脂 例

如 麥康凱 上培養分離

IVD

PDF 文件使用 "pdfFactory" 試用版本創建

api ® 20 E  07584E –  CN - 2004/05

bioMérieux ® SA 中文 - 2

使用說明

氧化酶試驗

必須按照制造商的使用說明進行氧化酶試驗 由于它是

終圖譜的主要數據 請將其記錄于結果報告單上 第二十

一個試驗

試條的準備

• 準備一個培養盒 盤和蓋子 倒入約 5ml 蒸餾水或軟化

水[或其它不含雜質或產生揮發性氣體的化學物質 如

Cl2, CO2,等 ]于盤的蜂窩小凹中 造成一個濕室

• 在盤的沿邊寫上菌株號(不要寫在蓋上 以免錯放)

• 從包裝中取出試驗條放到盤中

• 將試條置于孵育箱內

注意 API 20 E 只能用于腸道細菌和或非苛養的 G- 桿菌

苛養菌主要指對營養需求有特殊需要的菌(例 布魯氏菌屬

Brucella 和 法朗西絲菌屬 Francisella) 這些菌沒有包括在

API 20 E 數據庫中 必須采用有效方法 排除這些菌的存


接種物的準備

• 根據"警告及注意"一欄所列方法打開一安瓿 API 0.85%

NaCl 培養基 (5ml)或一安瓿 API 懸浮培養基(5 ml) 或

使用 5ml 0.85 %無雜質 無菌鹽水

• 用吸管或接種針從分離物的平板上挑取單個分純菌落至懸

浮基物中 建議使用新鮮培養 18-24 小時

• 仔細研勻以達到均一的細菌懸液

制備好的菌懸液必須立即使用

注意 大多數弧菌 Vibrio 均嗜鹽 如懷疑菌株為弧菌

請使用 0.85% NaCl (5ml) 培養基

試條的接種

• 用同一根吸管 將菌懸液充滿 CIT VP 和 GEL 管

的管部和杯部

• 其它管僅充滿管部(不是杯部)

• ADH, LDC, ODC, H 2 S 和 URE 管 用礦物油覆蓋 以形

成厭氧環境

• 蓋上培養盒

• 于 36°C ± 2°C 孵育 18-24 小時

判讀和解釋

試條的判讀

• 孵育后 根據使用手冊中的讀數表判讀各反應結果

• 如果 3 個或 3 個以上測定 GLU 試驗+或- 為陽性結果

記錄所有自發反應于結果報告單上并觀察需要附加試劑的

試驗的結果

- TDA 試驗 加 1 滴 TDA 試劑  深褐色為 陽性反應 記

錄于報告單上

- IND 試驗 加 1 滴 JAMES 試劑 反應立即發生  粉紅

色出現在整個反應應管者為 陽性 記錄于報告單上

- VP 試驗 加 1 滴 VP 1 和 1 滴 VP 2 試劑 至少等待

10 分鐘  淺粉或 紅色表明為 陽性結果 記錄于報告單

上 如 淺粉紅色在 10 至 12 分鐘內出現 判斷結果為 陰


注意 吲哚產生試驗必須后進行 因為該反應釋放的氣

體產物會干擾試條的其他試驗 在加入附加試劑后 請小

心勿調換培養盒蓋

• 如果加入附加試劑前陽性結果 包括 GLU 試驗 的數量

少于 3 個

- 重新培養 24 小時 ± 2小時 且不要加任何試劑

- 重新進行需要加入附加試劑的測試 如前說明

- 為了完成鑒定 可能需要進行補充試驗 參考有關鑒定

的段落

解釋

鑒定結果從 數字索引中獲得

• 所得的反應結果編為數字圖譜

所得反應的類型必須以數字化形式記錄在報告單 每 3 個

測定為一組 每個以 1 2 和 4 標明 在每組中 陽性反

應以相應的數字相加 由 API 20 NE 的 20 個測定可得一

個 7 位數 氧化酶反應構其第 21 個反應 如陽性則為


4

• 鑒定

使用數據庫 (V4.0)進行鑒定

* 根據數字圖譜

- 從使用手冊的讀數表中尋找數字圖譜

* 使用鑒定軟件

- 在鍵盤上輸入 7 位阿拉伯數字的圖譜

在某些情況下 7 位數檢索編碼還不能區分細菌 必須進行

以下一些補充試驗

- 硝酸鹽還原到亞硝酸鹽(NO2)和氮氣(N2) 各加一滴 Nit

1 和 Nit 2 試劑于葡萄糖 GLU 管內 待 2~3 分鐘后  紅

色表示 陽性結果(NO2) 陰性反應 黃色 可能由于還原

至 N2 有時還有氣泡 加 2-3mg 鋅粉到葡萄糖 GLU

管 5 分鐘后 如果管保持 黃色表示 陽性結果(N2) 記錄

于報告單 如果測定變 粉紅 這明是 陰性反應 硝酸鹽仍

留管內 被鋅粉還原 該反應用于檢測革蘭陰性 氧化酶

陽性的桿菌

注意 出于和吲哚試驗同樣的原因 參考 試條的判讀

中的注意項 硝酸鹽還原試驗必須后進行

- 動力 (MOB) 接種一安瓿 API M 培養基 參見產品說明


- 麥康凱 MacConkey 培養基生長實驗(McC) 接種一個

麥康凱 MacConkey 平板 參見產品說明書

- 葡萄糖氧化 (OF-O) 接種一安瓿 API OF 培養基 參見

產品說明書

- 葡萄糖發酵 (OF-F) 接種一安瓿 API OF 培養基 參見

產品說明書

這些在數值編碼本開始部分有所介紹的補充試驗 可以組

成 9 位數的數值索引 從而可以用鑒定軟件獲得鑒定結


5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae

如果分辨率很低 提議進行進一步的試驗 請參考鑒定軟

件或數值分析索引

PDF 文件使用 "pdfFactory" 試用版本創建

質 量 控 制

培養基 試驗條和試劑在有效期內不同階段需作系統的質量控制 對進行質控實驗室 推薦標準菌株 1.  大腸埃希菌

Escherichia coli ATCC ® 25922 或以下菌株之一

2.  嗜麥芽糖寡養單胞菌 Stenotrophomonas maltophilia

ATCC 51331

3.  陰溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

ATCC 13047

4.  奇異變形桿菌 Proteus mirabilis

ATCC 35659

5.  肺炎克雷伯菌肺炎亞種 Klebsiella pneumoniae ssp

pneumoniae  ATCC 35657

ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.

ONPG ADH LDC ODC CIT H 2 S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA NO 2 N 2 *

1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –

2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –

3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –

4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –

5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –

* ATCC 13047 和 ATCC 25922 菌株可能會觀察到 N 2 (+)結果

• ATCC 51331 菌株于胰酶大豆血瓊脂上孵育 24-48 小時 可以獲得反應圖譜

• 其他的菌株于胰酶大豆血瓊脂上孵育 18-24 小時 可以獲得反應圖譜

• 請使用 API NaCl 0.85 % 培養基制備菌懸液

根據當地相應的規定進行質量控制是使用者的責任

方法 的 局限 性

• API 20 E 鑒定系統能準確鑒定在鑒定范圍 請查閱該說

明書后的鑒定表 內的腸道細菌和非苛養 革蘭氏陰性桿

菌菌種 但不能用于鑒定/排除鑒定范圍外的微生物

• 由于在反應原理上 API 技術與傳統技術間存在差異 有可

能出現與常規方法不同的生化反應結果 同時由于所用底

物的差異亦造成陽性反應百分比的不同

• 在某些非常罕見的情況下 某些微生物如克雷伯菌屬

Klebsiella 或變形菌屬 Proteus 與葡萄糖的反應可

能會由陽性轉變為陰性 例如可以觀察到藍綠色變化 這

個反應將記錄為陰性反應 這種情況已經被反映到鑒定表

中的鑒定百分率上

• 如 果 鑒 定 為 沙 門 菌  Salmonella  或 志 賀 菌

Shigella 請進行血清學鑒定以確認鑒定結果

• 分離自膽囊纖維化病人的非發酵革蘭陰性桿菌可能會產生

不典型的生化圖譜 影響鑒定的結果

• 必須使用單個微生物的純培養

預 期 值范圍

參閱在本說明書尾部的 反應鑒定表 以取得有關各種生

化反應陽性率的資料

性能

• 腸桿菌

對共 5514 株 本產品鑒定范圍內的 不同來源的臨床及

收藏菌株鑒定結果顯示

- 92.80 % 的菌株可被準確鑒定 需要或不需附加檢測

- 4.61 % 的菌株無法鑒定

- 2.59 % 的菌株被錯誤鑒定

• 其它非苛養革蘭陰性桿菌

對共 2386 株 本產品鑒定范圍內的 不同來源的臨床及

收藏菌株鑒定結果顯示

- 90.32 % 的菌株可被準確鑒定 需要或不需附加檢測

- 6.16 % 的菌株無法鑒定

- 3.52 % 的菌株被錯誤鑒定

廢 物處理

所有使用或未使用的試劑和其他污染性材料應遵循傳染性

或潛在傳染性產品的處理程序

每個實驗室都有責任根據其實驗的類型和危險性級別進行

廢物和污物的處理 同時要嚴格依照有關的規定對待和處

理所有的廢物和污物

擔保

生物梅里埃 bioMérieux 拒絕任何形式的擔保 明確的或暗

指的 包括任何暗含的商業性和具有特殊用途適用性的擔

保 生物梅里埃 bioMérieux 將不對任何偶然的和相因而生

的損害承擔義務 生物梅里埃也不會對任何使用者提出的

超過其用于支付購買生物梅里埃產品或服務的償還要求承

擔義務


結 果 判 讀 表

結果

試驗 有效成分


(mg/cup.)

反應/ 酶

陰性 陽性

ONPG

鄰硝基苯-半乳糖苷

0.223

β-半乳糖苷酶 無色 黃色(1)

ADH 精氨酸 1.9 精氨酸雙水介酶 黃色 紅/橙色(2)

LDC 賴氨酸 1.9 賴氨酸脫羧酶 黃色 橙色(2)

ODC 鳥氨酸 1.9 鳥氨酶脫羧 黃色 紅/橙色(2)

CIT 檸檬酸鈉

0.756

檸檬酸利用 淡綠/黃 蘭綠/蘭(3)

H2S 硫代硫酸鈉 0.075 H2S 產生 無色/微灰 黑色沉淀/細線

URE 脲素 0.76 脲酶 黃色 紅/橙色(2)

TDA /立即

TDA 色氨酸

0.38

色氨酸脫氨酶

黃色 深褐

JAMES / 立即

IND 色氨酸

0.19

吲哚產生

無色/淺綠/黃色

粉紅

VP 1 + VP 2 / 10 分鐘

VP 丙酮酸鹽 1.9

3-羥基丁酮產生乙酰甲基甲


無色 粉紅/紅色 (5)

GEL

Kohn 明膠 0.6 明膠酶 黑色素不擴散 黑色素擴散

GLU

葡萄糖

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

MAN

甘露醇

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

INO

肌醇

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

SOR

山梨醇

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

RHA

鼠李糖

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

SAC

蔗糖

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

MEL

密二糖

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

AMY

苦杏仁苷

0.57 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

ARA

阿拉伯糖

1.9 發酵/氧化(4)

蘭/蘭綠 黃色

OX (看氧化酶試驗說明書) 細胞色素氧化酶 (看氧化酶試驗說明書)

(1)  出現淺黃色應判斷為陽性結果

(2)  孵育 36-48 小時后 出現橙色應判斷為陰性結果

(3)  讀小杯頂部的結果 需氧

(4)  發酵始于小管的底部 氧化開始于杯部

(5)  10 分鐘后出現的淺粉紅色應判斷為陰性結果

• 標示的量可能因使用原料的濃度不同而有所調整

• 某些杯含有動物源性產品 特別是蛋白胨

梅里埃20100 腸桿菌鑒定試劑盒API20E

梅里埃20100 腸桿菌鑒定試劑盒API20E

 

 

 


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